Applicazioni moderne della genetica microbica (Microbiologia)

Carte di ripasso sulle applicazioni moderne della genetica microbica. Gli strumenti dell'ingegneria genetica: DNA ricombinante e clonaggio molecolare, enzimi di restrizione ed estremità coesive rispetto a quelle piatte, DNA ligasi, vettori plasmidici, il sito di clonaggio multiplo, marcatori selezionabili, pUC19 e lo screening blu-bianco, trasformazione e competenza, plasmidi F e fagemidi, librerie genomiche e di cDNA, metodi di trasfezione (elettroporazione, microiniezione, cannoni genici), vettori navetta, il plasmide Ti e vettori virali. Visualizzazione e caratterizzazione di DNA, RNA e proteine: elettroforesi su gel di agarosio, bromuro di etidio, gel a campo pulsato, RFLP, sonde a DNA e ibridazione, blot Southern, Northern e di colonie, microarray, la reazione a catena della polimerasi e le sue fasi di denaturazione, appaiamento ed estensione, Taq polimerasi, RT-PCR e qPCR, sequenziamento Sanger e di nuova generazione, GenBank, PAGE e SDS-PAGE, oltre a NAAT, ribotipizzazione e rep-PCR. Metodi sull'intero genoma: trascrittomica, proteomica, metagenomica, farmacogenomica e metabolomica, genetica inversa, geni reporter e biomarcatori, oltre alle applicazioni farmaceutiche (insulina ricombinante, ormone della crescita, Fattore VIII e tPA, vaccini a subunità, e interferenza dell'RNA con siRNA, miRNA, Dicer e RISC). E la terapia genica: vettori adenovirali, SCID e deficit di adenosina deaminasi, la morte di Jesse Gelsinger, mutagenesi inserzionale, terapia somatica rispetto a quella germinale, e regolamentazione.