Aplicações modernas da genética microbiana (Microbiologia)

Cartões de revisão sobre as aplicações modernas da genética microbiana. As ferramentas da engenharia genética: DNA recombinante e clonagem molecular, enzimas de restrição e extremidades coesivas em comparação com as cegas, DNA ligase, vetores plasmidiais, o sítio de clonagem múltipla, marcadores selecionáveis, pUC19 e a triagem azul-branco, transformação e competência, plasmídios F e fagemídeos, bibliotecas genômicas e de cDNA, métodos de transfecção (eletroporação, microinjeção, canhões de genes), vetores de transporte, o plasmídio Ti e vetores virais. Visualização e caracterização de DNA, RNA e proteína: eletroforese em gel de agarose, brometo de etídio, géis de campo pulsado, RFLP, sondas de DNA e hibridização, blots Southern, Northern e de colônias, microarranjos, a reação em cadeia da polimerase e suas etapas de desnaturação, anelamento e extensão, Taq polimerase, RT-PCR e qPCR, sequenciamento Sanger e de nova geração, GenBank, PAGE e SDS-PAGE, além de NAATs, ribotipagem e rep-PCR. Métodos de genoma completo: transcritômica, proteômica, metagenômica, farmacogenômica e metabolômica, genética reversa, genes repórteres e biomarcadores, além de aplicações farmacêuticas (insulina recombinante, hormônio do crescimento, Fator VIII e tPA, vacinas de subunidade, e interferência de RNA com siRNA, miRNA, Dicer e RISC). E a terapia gênica: vetores de adenovírus, SCID e deficiência de adenosina desaminase, a morte de Jesse Gelsinger, mutagênese insercional, terapia somática em comparação com a germinativa, e regulamentação.